Identificación y tipificación de Haemophilus influenzae mediante PCR múltiple / Use of multiplex PCR for detection and identification of Haemophilus influenzae

Se diseñó una estrategia metodológica para la detección simultánea entre Haemophilus influenzae serotipo b (Hib) y no tipificable (HiNT), así como para discriminar entre H. influenzae, Moraxella catarrhalis y Streptococcus pneumoniae. El estudio se realizó en una recolección de 64 cepas, las cuales se sometieron a amplificación por PCR utilizando ADN genómico o directamente el cultivo bacteriano como plantilla. La PCR se realizó en dos fases: 1) PCR triple para discriminar entre H. influenzae y M. catarrhalis empleando oligonucleótidos específicos para los genes del ARNr 16S y de la neumolisina (Ply) para identificar S. pneumoniae; 2) PCR doble para la identificación simultánea de Hib y HiNT, utilizando oligonucleótidos específicos de los genes cap y hmw. Se logró la amplificación del gen ARNr 16S en las 64 cepas de H. influenzae, sin obtenerse amplificación en las cepas control. La secuencia Bex A se amplificó en 29 de 32 cepas de Hib, y la secuencia HMWA se amplificó en 29 de 30 cepas de HiNT. La amplificación con los oligonucleótidos específicos para M. catarrhalis y S. pneumoniae no mostró productos con ninguna cepa de H. influenzae. Estos resultados permiten proponer la aplicación de esta herramienta metodológica para discriminar entre M. catarrhalis y S. pneumoniae, e identificar H. influenzae directamente a partir de muestras clínicas.

Miniesternotomia e mini-incisão: experiência inicial do Instituto Dante Pazzanese de Cardiologia / Initial study in ministernotomy and mini-incision Dante Pazzanese Institute of Cardiology

OBJETIVO: Como opção para abordagem cirúrgica do coração temos a miniesternotomia e a mini-incisão, sendo a última caracterizada por uma pequena abertura na pele com secção mediana total do esterno. O objetivo deste trabalho é avaliar estas duas opções de abordagem do coração quanto a viabilidade, reprodutividade e efeito estético final. CASUÍSTICA E MÉTODOS: Foram realizadas miniesternotomias em "H" e em "L" e operações através de mini-incisão para tratamento de valvopatias (aórtica e mitral), cardiopatias congênitas (CIV e CIA) e revascularização do miocárdio. Analisamos 35 pacientes, sendo 10 (40 porcento) submetidos a miniesternotomia e 25 (60 porcento) a mini-incisão. A idade média foi de 23,4 anos (variando de 1,3 a 52 anos de idade) com predomínio do sexo feminino (54 porcento). RESULTADOS: As operações realizadas foram: troca de valva aórtica em 9 (25,7 porcento) pacientes (8 próteses biológicas e uma metálica); troca de valva mitral em 6 (17,1 porcento) casos (em todos utilizou-se próteses biológicas) e uma plastia mitral (2,9 porcento); 2 (5,8 porcento) pacientes com troca mitro-aórtica; atrioseptoplastia em 13 (37,1 porcento); ventriculoseptoplastia em 1 (2,9 porcento); e 3 (8,5 porcento) revascularizações do miocárdio sendo uma sem o auxílio de circulação extracorpórea. A abordagem cirúrgica foi feita por miniesternotomia em "H" em 7 (20 porcento) casos em "L" em 3 (8,5 porcento) e nos 25 casos restantes via mini-incisão. O tamanho das incisões variou de 7 a 14 cm, com média de 9,9 cm. CONCLUSÃO: Estas duas vias de acesso ao coração na operação cardíaca são perfeitamente viáveis e reprodutíveis, sem alteração no tempo cirúrgico, bem como no tempo de CEC, não acarretando portanto, maiores riscos ao paciente, apresentando efeito estético final melhor do que as esternotomias convencionais